Hội Nghị DNA/RNA/Peptide (TIDES2008, 19, 20, 21 tháng 5 năm 2008)
Ts Vũ Mạnh Huỳnh
Thưa các bạn,
Xin có vài hàng về Hội Nghị TIDES2008 tại Las Vegas, Nevada.
TIDES2008 quy tụ khoảng 800 các chuyên gia về DNA/RNA.
Tựu chung thì các buổi họp này có các chuyên gia phát biểu, nói về các vấn đề khó khăn trong phương pháp tổng hợp, và QC (Quality Control), để sản xuất các antisense của siRNA, microRNA, shRNA, và mRNA, và có các chuyên gia từ các hãng Biotech, và từ US-FDA có các bài thuyết trình về Regulatory Affair (RA), và QA (Quality Assurance) cho các công trình sản xuất các diagnostic drugs, amplification dùng trong y học, thực phẩm và nông nghiệp, và antisense drugs dùng trị bệnh.
Các hãng thuốc đang nhắm vào việc sequencing của shRNA (short hairpin), độ dài khoảng 44-55 nucleotide(nt), và microRNA, độ dài khoảng 19-22 nt.
Có nhiều
bằng chứng, chứng minh cho thấy trong quá trình sinh sản ra mRNA, rất
nhiều đoạn microRNA phát sinh, và chính các đoạn này đã là mầm mống sinh
sản tế bào ung thư. Hãng Ambion chuyên sản xuất DNA/RNA, khảo cứu về microRNA,
và sản xuất nhiều antisense cho microRNA, hãng này đã quản sát được nhiều
hoạt tính kháng ung thư rất hay, và khoảng 10 nhân viên cao cấp của hãng
DNA Ambion, đã lập ra hãng Asuragen, và đã được ABI (Applied Biosystem
Inc), để ý. Hiện Asuragen vẫn đang trên đường phân tích microRNA.
Vì microRNA là những đoạn RNA ngắn
cho nên rất dễ cho chuyên gia sản xuất. Tuy nhiên trong qua trình sản
suất dùng máy tổng hợp DNA/RNA, để sản xuất 400 umole RNA làm thuốc, khọng
phải là chuyện dễ dàng như DNA. Vì RNA mang gốc OH ở vị trí carbon 2',
quá gần với trung tâm phản ứng phos phát, ở vị trí carbon 3', ngay bên
cạnh, trên cấu trúc đường (Carbohydrate) của nucleotide. Hơn thế nữa gốc
OH này lại phải được bảo vệ bởi nhóm hóa chất Silyl (t-butyl-dimethyl
silyl). Các chuyên gia dùng HPLC cho thấy phẩm vật từ máy synthesizer
chứa nhiều chất sinh ra sau mỗi vòng phản ứng của máy. Họ đã dùng HPLC
để tinh chế, tuy nhiên họ chỉ lấy được sản phẩm với 88%. Nếu họ không
đặt được 98% + thì thuốc này sẽ không được thông qua bởi US-FDA.
Vì lý do trên mà hội nghị này đã tập trung vào việc dùng máy tổng hợp DNA/RNA, và máy tinh chế HPLC tốt.
Các chuyên gia đã cho thấy rằng để tổng hợp, và đạt phẩm chất microRNA cao, họ phải dùng thuốc phosphoramidite tốt, và support thể dắn với loading là 200 umole cho DNA, và 90 umole cho RNA.
Các chuyên gia còn thuyết trình các nucleotide LNA (Lock Nucleic Acid) có khả năng gia tăng tính complementary, gia tăng thermal stability, melting temperature, và hybridization assay, khi họ chỉ thay thế vài nucleotide bằng LNA trên chuỗi microRNA. LNA mang một cầu nối methylene, nối 2'-O với 4'-C, và tạo ra bi-cyclic ribose, và từ đó phát sinh ra cấu trúc 3'-Endo. LNA được dùng rất hữu hiệu trong Microarray, Realtime PCR, và FISH
Vài hàng góp ý với các anh chị em.
Ts Vũ Mạnh Huỳnh
Bio-VN
>>>back>>>
