Y SINH HỌC 

Mabs and Protein Expression using Baculovirus Expression System
Tiến sĩ Lê văn Phan, DMV, Ph.D.

Nhận thấy vấn đề sản xuất Kháng thể đơn dòng (Mab) và protein expression using Baculovirus expression system còn có vẻ mới ở trong nước (mặc dù đã phát triển xấu rộng ở nước ngoài) vá có nhiều người quan tâm đến vấn đề này, là người làm trực tiếp trong phòng thí nghiệm (cụ thể tôi đã tạo Mabs cũng như recombinant proteins đối với influenza H9N2, H5N3, and human rotavirus) và có đôi chút kinh nghiệm đối với hai vấn đề này nên tôi cũng mạnh dạn trao đổi trong phạm vi kỹ thuật.

- Về Kháng thể đơn dòng (KTDD) thì phương pháp này đã được phát triển và đưa vào ứng dụng từ những năm 80, và cho thấy những ý nghĩa vô cùng to lớn trong chẩn đoán và trị liệu. Là người làm trực tiếp nên tôi thấy đây không phải là phương pháp khó tiếp cận,...

Trước đây việc sản xuất KTDD mất ít nhất 6 tháng (tính từ lúc immunization) để có được clone of hybridoma cells tiết KTDD, ngày nay quy trình đã được rút ngắn còn 1 nửa, quy trình tôi đang làm thường chỉ mất khoảng 2 tháng là có được KTDD trong tay. Bước quan trọng nhất của SX KTDD là bước fusion tạo hybridoma cells và sau đó là screening để thử clone tiết KT mạnh. Khi đã có được CLONE tiết KT thì việc tạo KT với nồng độ cao không quá khó, chỉ cần inject the hybridoma cells tiết KT vào xoang bụng chuột BALb/C, thử ascited fluid. Nếu làm tốt thì ta có thể thu được 7-10ml KT/chuột (1mg-30mg/ml of Mab).

Nói vậy để thấy có thể khi dùng KTDD trong trị liệu chúng ta cần lượng rất lớn, tiêu tốn money, nhưng trong chẩn đoán thì lượng antibody cần không đáng là bao. KTDD tạo ra có thể sử dụng như là specific antibody for antigen detection.

- Về Protein expression using Baculovirus expression system, theo như tôi được biết thì việc tạo subunit vaccine dựa trên công nghệ này vẫn chủ yếu nằm trong phòng thí nghiệm. Tuy nhiên trong chẩn đoán thì việc biểu hiện protein tái tổ hợp sử dụng Baculovirus expression system đang phát triển khá xâu rộng trong lĩnh vực virus. Cụ thể các genes encoding for viral capsid protein (or internal protein....) được cloned, expressed and the recombinant proteins will be used as specific antigen for antibody detection. Đặc biệt khi đã có được recombinant proteins thì việc tạo Mab rất nhanh và đơn giản. Khi đó ta có được both specific antigen and antibody for diagnosis.
Sincerely,

Le Tran Phan, DVM, PhD (Bio-VN)
Foot and Mouth Disease Laboratory
Foreign Animal Disease Division
National Veterinary Research & Quarantine Service, South KOREA
Tel (lab). 82 31 467 1719; Fax. 82 31 449 5882
Handphone. (82) 010- 8121-1905
E-mail. levanphan@nvrqs.go.kr or letranphan@gmail.com
CV: http://sites.google.com/site/letranphan/welcome-to-my-profile

TAGS: Mabs, Protein expression, Baculovirus expression system, Le Tran Phan

>>>back>>>